Superbe ! =) les photo sont très jolies
N'hésites pas à détailler ton protocole dans un post, c'est toujours sympa ce genre d'informations !
Quelques expériences in vitro
- arnaudcarni
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Re: Quelques expériences in vitro
vraiment super ! bravp !
mon compte flickr : https://www.flickr.com/photos/125231358@N05/
- Jardimanche
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- Localisation : Montpellier
Re: Quelques expériences in vitro
Magnifique Franck!
En appui avec dede718, pourrais tu préciser le milieu utilisé, son pH.... Quelques détailles qui seraient vraiment intéressant?
Bravo pour cette réussite!
En appui avec dede718, pourrais tu préciser le milieu utilisé, son pH.... Quelques détailles qui seraient vraiment intéressant?
Bravo pour cette réussite!
- Franck31620
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- Enregistré le : 25 sept. 2014 6:28
- Localisation : TOULOUSE
Re: Quelques expériences in vitro
Merci pour tous vos commentaires (avec beaucoup de retard!!!).
Promis, j'ouvrirais un post sur mes conditions de culture in vitro (un jour...).
Pour le moment, je partage avec vous mon nouveau défis in vitro: LA CULTURE DE MÉRISTÈME.
Un méristème est une zone de la plante où les cellules prolifèrent. Il est constitué de cellules indifférenciées, capables de se diviser longtemps après la fin de l'embryogenèse.
C'est la technique qu'utilisent les Hollandais pour multiplier les Phalaenopsis et autres (même les plantes carnivores)
Je fais mes premiers essais sur des graines de Darlingtonia californica commandées chez Carnilandes (Au passage, bravo pour la fraicheur!).
Les plus gros challenges sont d'opérer en conditions stériles (hotte à flux laminaire) sur des ordres de grandeur du 1/10ème de mm (loupe binoculaire) et de trouver le bon milieu de culture...
Première étape, la dissection sous loupe binoculaire. Sur la photos ci-dessous, l'espace entre deux traits est de 1 mm (réglet).
Détail des téguments qui demandent un processus de stérilisation 'violent'
Mise en évidence de l'embryon qui sera prélevé et mis en culture.
Suite au prochain épisode...
Promis, j'ouvrirais un post sur mes conditions de culture in vitro (un jour...).
Pour le moment, je partage avec vous mon nouveau défis in vitro: LA CULTURE DE MÉRISTÈME.
Un méristème est une zone de la plante où les cellules prolifèrent. Il est constitué de cellules indifférenciées, capables de se diviser longtemps après la fin de l'embryogenèse.
C'est la technique qu'utilisent les Hollandais pour multiplier les Phalaenopsis et autres (même les plantes carnivores)
Je fais mes premiers essais sur des graines de Darlingtonia californica commandées chez Carnilandes (Au passage, bravo pour la fraicheur!).
Les plus gros challenges sont d'opérer en conditions stériles (hotte à flux laminaire) sur des ordres de grandeur du 1/10ème de mm (loupe binoculaire) et de trouver le bon milieu de culture...
Première étape, la dissection sous loupe binoculaire. Sur la photos ci-dessous, l'espace entre deux traits est de 1 mm (réglet).
Détail des téguments qui demandent un processus de stérilisation 'violent'
Mise en évidence de l'embryon qui sera prélevé et mis en culture.
Suite au prochain épisode...
Re: Quelques expériences in vitro
Ca c'est bien intéressant !
Il me semble qu'une des choses difficiles, c'est notamment de stériliser le méristème sans le cramer ? Typiquement dans le cas d'un Nepenthes ou d'un Heliamphora ?
J'espère que tu vas gérer le coup, et trouver le milieu adéquat .
Il me semble qu'une des choses difficiles, c'est notamment de stériliser le méristème sans le cramer ? Typiquement dans le cas d'un Nepenthes ou d'un Heliamphora ?
J'espère que tu vas gérer le coup, et trouver le milieu adéquat .
Vince
Mes plantes
Mon terrarium highland
Liste de culture
"Il n'y a pas de plante difficile, il faut juste trouver les bonnes conditions"
Aide-toi et le ciel forum t'aidera.
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"Il n'y a pas de plante difficile, il faut juste trouver les bonnes conditions"
Aide-toi et le ciel forum t'aidera.
- Franck31620
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- Enregistré le : 25 sept. 2014 6:28
- Localisation : TOULOUSE
Re: Quelques expériences in vitro
Merci pour tes encouragements Vincent.
C'est l'un des principaux intérêts de la culture in vitro, à l'opposé du clonage intensif.
Tu peux sauver une plante rare mais virosée, ou bien multiplier (clones) un individu rare en collection.
Récemment, un collectionneur m'a contacté au sujet d'un Nepenthes Jamban femelle qui faisait la gueule...
Je vais me faire la main sur des hookeriana et ventricosa, j'en ai à la pelle ;)
Le méristème est stérile par nature, même chez une plante virosée. Si tu travailles proprement tu n'as pas besoin de le stériliser.stériliser le méristème sans le cramer
C'est l'un des principaux intérêts de la culture in vitro, à l'opposé du clonage intensif.
Tu peux sauver une plante rare mais virosée, ou bien multiplier (clones) un individu rare en collection.
Récemment, un collectionneur m'a contacté au sujet d'un Nepenthes Jamban femelle qui faisait la gueule...
Je vais me faire la main sur des hookeriana et ventricosa, j'en ai à la pelle ;)
- gabgabinou
- Messages : 1047
- Enregistré le : 03 oct. 2010 14:02
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Re: Quelques expériences in vitro
Quand tu dis cramer, c'est parceque pour le stériliser tu le passe au dessus de la "flamme" ou le cramer a cause d'un produit désinfectant trop "fort" ?Vince81 a écrit : Il me semble qu'une des choses difficiles, c'est notamment de stériliser le méristème sans le cramer ? Typiquement dans le cas d'un Nepenthes ou d'un Heliamphora ?
J'espère que tu vas gérer le coup, et trouver le milieu adéquat .
En tout cas, le post est vraiment trèèèès intéressant !
Je vais suivre ça de très prêt !
Une autre question, une zone méristématique est toujours stérile tu dis. Dans n'importe quelle partie de la plante ?
Chez un nep, où peut-on les trouver pour être sure de ne pas sacrifier une plante pour rien inutilement ?
Les plus anciens jardiniers disaient :
" Tant qu'on n'a pas réussi a multiplier une plante, on n'en maîtrise pas la culture... "
" Tant qu'on n'a pas réussi a multiplier une plante, on n'en maîtrise pas la culture... "
- Franck31620
- Messages : 29
- Enregistré le : 25 sept. 2014 6:28
- Localisation : TOULOUSE
Re: Quelques expériences in vitro
On réserve la flamme pour les instruments (scalpels, foreceps...)Quand tu dis cramer, c'est parceque pour le stériliser tu le passe au dessus de la "flamme" ou le cramer a cause d'un produit désinfectant trop "fort" ?
Pour les plantes, on utilise des produits chimiques comme l'eau de javel, l'eau oxygénée...plus ou moins dilués pour bien stériliser mais pas tuer le tissu.
Le schéma ci-dessous (désolé pour mes compétences de dessinateur très limitées!)montre les différentes zones méristématiques. En général, on décapite la plante pour utiliser le Méristème apicalUne autre question, une zone méristématique est toujours stérile tu dis. Dans n'importe quelle partie de la plante ?
caulinaire et un ou plusieurs Méristèmes axillaires. La plantes à toujours la possibilité de repartir d'un bourgeon axillaire.
Re: Quelques expériences in vitro
Pour la stérilisation, je pensais à la stérilisation des tissus pour la mise en milieu de culture. Tu me contrediras si je me trompe, mais il est plus difficile de récupérer le méristème sans contamination d'une plante en pleine croissance, que de stériliser une graine pour débuter dans l'IV.
Je pensais bien à ça :
Je pensais bien à ça :
Faut que tu te fasses vite la main avant que le N. jamban ne crève !pour bien stériliser mais pas tuer le tissu
Vince
Mes plantes
Mon terrarium highland
Liste de culture
"Il n'y a pas de plante difficile, il faut juste trouver les bonnes conditions"
Aide-toi et le ciel forum t'aidera.
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- Franck31620
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- Localisation : TOULOUSE
Re: Quelques expériences in vitro
Tu as tout à fait raison Vincent, même s'il faut, dès la collecte des graines prendre le plus grand soin à ce qu'il n'y ai pas d'éléments étrangers (reste de pistil, de capsule...).il est plus difficile de récupérer le méristème sans contamination d'une plante en pleine croissance, que de stériliser une graine pour débuter dans l'IV.
La CIV à partir de tissu demande à mon avis de maîtriser très correctement la CIV à partir de graines.
Si ça t'intéresse, tu peux venir faire une petite cession de CIV chez moi. Philippe est sur les rails (il va venir repiquer ses Aechmea lueddemanniana), hein Philippe et Julien m'a fait le plaisir de passer une journée avec moi pour me perfectionner dans l'utilisation de la hotte à flux laminaire.